研究揭示CRISPR/Cas9切割基因的方式R-loop

医疗器械 2016-01-18 15:10 来源：来宝网

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一组研究人员与美国加州大学一道利用结晶技术了解了CRISPR/ Cas9基因进行剪接的过程。在发表在科学（Science）杂志上的论文中，他们介绍了该技术过程中已知称为R-loops的三链结构的形成方式，以及他们如何使用掌握的技术来捕获此过程的三维图像，还有他们所得到的结果。

在过去的三年中，CRISPR/Cas9基因剪接和编辑工具已被用于各种实验，以更好地了解基因是如何工作的，并有可能对其进行编辑来治愈遗传性疾病。最近新闻再次报道两个团队都声称是该技术的首个发明者，美国专利和商标局已经同意推进干扰听证会，以对案件做出裁决。其中由Jennifer Doudna带领的团队，现在已经更加明确R-loop的形成方式是此技术手段的一部分。

CRISPR/Cas9技术，顾名思义，是基于Cas9蛋白质和其会导致R-loop的形成，但到现在为止，没有人见过它实际上是怎样工作的。在这个新的研究中，研究人员使用了一个此前被用于研究蛋白质的技术——其中所研究的蛋白质被形成结晶体，然后暴露于X射线下——所形成衍射图案为研究其结构提供了线索。在这种情况下，该技术在Cas蛋白正在编辑DNA序列时被研究人员用来捕捉其三维图像——这些图像表明，蛋白质和DNA链之间的相互作用会导致DNA链弯曲一个30°角，这会使DNA和RNA链移动到一个位置，在此会形成一个R-loop。

在基因剪接的过程中了解R-loop是如何以及为何形成，对于提高该技术是非常关键的——可能会犯一些错误，如认错和切错DNA链。但它也可能有助于在不同情况下确定其它或被用于同样目的的蛋白质。

原文检索

《Study reveals the way CRISPR/Cas9 cleaves enzymes and positions them for cutting》

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