CAR-T细胞治疗质量控制浅谈

细胞治疗，将改变人类疾病的治疗方式，由过去重复的症状控制转为一次性的治愈，是引领生物医学的希望。其中，嵌合抗原受体（CAR）T细胞疗法是近年来发展非常迅速的一种细胞治疗技术。

目前在全球已有两款药物获得FDA的批准上市，分别是诺华的Kymriah和凯特的YESCARTA，中国有多家公司产品进入临床申报或处于已获批阶段，这种疗法已成为更多患者的选择，CAR-T细胞制造过程符合全球监管要求成为广泛讨论的话题。

1.细胞治疗质量控制分析

其中细胞质量控制贯穿CAR-T从研发到临床的所有步骤，但CAR-T作为“活”的药物，其很多特性与传统药物有很大的差别，下表列举了与传统药物的主要差异点：

第一个上市的CAR-T药物Kymriah的释放标准涉及到多个方面的指标，下图是小编收集到的Kymriah的释放指标所需要测试的实验：

KITE的YESCARTA的质量控制也涉及到非常多的生物学实验，篇幅有限，就不一一列举了，具体指标可参考如下的链接：

https://www.fda.gov/downloads/BiologicsBloodVaccines/CellularGeneTherapyProducts/ApprovedProducts/UCM584335.pdf

另一方面CAR-T制造工艺复杂，下图列举了CAR-T的制作流程，其中涉及到病毒转染，外源物质的引进，长时间培养等因素，这势必对质量控制提出了巨大的挑战。

2.细胞治疗质量控制原则及法规

基于以上原因，CAR-T细胞质量控制特别强调制备工艺的稳定性、多批次验证、全程质控和按照SOP严格操作。要建立稳定的质量检验和放行检验标准。

美国和欧洲出台了相应的法规来规范细胞治疗的质量控制，以下是国外针对细胞治疗出台的相关政策法规：

在我国，细胞治疗的国家主管部门是国家卫生和计划生育委员会（NHFPC）和国家食品药品监督管理总局（CFDA），下图是我国针对细胞治疗出台的相关政策法规：

以下以CTL019为例来分析细胞治疗质量控制策略，目前细胞治疗产品的质量控制分为四个大的方面，分别为安全性（Safety），纯度（Purity），潜能性（Potency）以及均一性（Identity），这些质量控制会贯穿CAR-T生产的不同阶段，下图列举了这些检测会在不同的阶段开展。

3.生物学实验用于质量分析带来的挑战

在这些实验中，大部分是生物学实验，生物学实验因为操作方法，样本差异等因素会给结果带来较大的波动，也给这些方法向GMP转移带来了挑战，同时这些实验结果的验收标准和规范难以制定，以CAR-T的转染效率测定为例，不同的人对流式细胞仪结果设门得到的差异会有较大的差异。

4.细胞治疗质量控制的基石实验--浓度、活率

细胞浓度活率测试方面，其是很多生物学实验的基础，比如细胞生长速率测定，细胞因子检测，细胞生物学效应检测方面，细胞计数是这些实验的第一步，这一步如果错误，那么结果波动大是预料之中的。另外在在细胞培养过程中，极为重要的一点是优化细胞培养条件。细胞的浓度，活率，结团率，形态是了解反应器中细胞培养状态的重要指标。总而言之，CAR-T从细胞收集开始到最后的产品回输，浓度活率一直是最关键的指标之一。

既然浓度活率对于CAR-T整个生产过程这么的重要，小编自作主张的调研和试用了市场上最畅销的几款细胞计数仪，尤其衷爱我国自主研发生产的Countstar Rigel荧光细胞分析仪。不得不说，这款产品的智能、精准、合规满足了小编对细胞计数仪所有的想象。

智能

作为新时代年轻人，触屏的使用已经深入人心，这款产品的设计也让小编有告别传统PC时代，与科技进步共发展的认同感。

只需动一动手指，即可全自动获得细胞分析结果和图像。高质量的图像可通过多点触控放大或缩小，让你看得真切，让小编对结果的真实性不再怀疑。三分钟检测五个样，用这样的神器，老板再也不用担心我的计数速度啦。

正是这款小小的荧光细胞分析仪其实具有大智慧。除细胞浓度活率检测外，对于CarT细胞中效应细胞毒性、细胞凋亡等测试这款仪器也能进行很好的分析。

精准

小编亲测，使用AOPI活率检测程序测试细胞浓度和活率，看一遍即会使用，5槽测试结果CV＜5%，线性R2＞0.99，多台仪器间测试结果一致。多个地区，多类样品，多个人开展测试，也不再担心数据的一致性。

Countstar Rigel 的AOPI细胞活率测试，可用于全血的质量评估，PBMC分离效率检测，T细胞的培养状态，T细胞的增殖率和活率，产品释放质量控制，在CarT细胞治疗整个质量控制过程均可使用。

合规

从美国药典，FDA以及CFDA的法规来看，对细胞治疗产品用于药品，符合GMP规范进行管理成为未来的趋势。所以，小编对仪器最重要最基本的要求就是需要符合GMP/cGMP、数据审计追踪、FDA 21 CFR PART 11。Countstar Rigel从设计到服务完全符合这个要求！同时，Countstar Rigel提供标准微珠颗粒、3Q验证服务，并且经SGS专业测试验证，符合ISO14644 Class5（GMP B级）环境使用要求。可以在GMP B+A级洁净环境下放心使用。

据了解，Countstar（IC1000，BioMed）在全球已销售2000多台，在细胞治疗行业有超过200个客户，有超过10家用户正在进行临床申请。Countstar 9年只做一件事，努力做最好的荧光细胞分析仪。Countstar Rigel是值得期待的，必以势如破竹之势，让细胞质量控制迈入智能时代，成为细胞治疗“行业首选”。

来源：医麦客

作者：可乐

来源：医麦客   作者：可乐