间充质干细胞（MSC）治疗肝衰竭的临床研究进展（文献解读）

2006年，失代偿期肝硬化患者输入自体骨髓单个核细胞（mononuclear cell，MNC），肝功能得到明显改善[1]。在2007年及2011年，两个研究小组均进一步验证了骨髓单个核细胞改善肝功能的疗效[2, 3]。

2009年瑞典报道了自体骨髓间充质干细胞治疗肝硬化的I-II期临床试验结果[4]，首次证明了骨髓间充质干细胞单次治疗能降低终末期肝病评分（End-Stage Liver Disease Score，MELD评分），改善肝功能，降低转氨酶和胆红素，而且没发现不良反应。这些骨髓间充质干细胞经过2周的培养，3 x 107-5 x 107个细胞通过肝脏介入方法直接注射到肝脏。治疗半年后，肝功能改善明显，MELD评分和INR指标明显下降。

2011年中山大学第三附属医院报道了自体骨髓间充质干细胞单次治疗乙肝肝衰竭的大样本临床研究[5]，间充质干细胞治疗（剂量为1 x 107、肝脏介入治疗）后短期（一个月）效果明显，肝功能改善，MELD评分降低，但是治疗组和对照组的48周的MELD评分和生存率（约50%）没有差异，肝癌的发生率也没有差异。

一年后的2012年，北京302医院报道了异体脐带间充质干细胞治疗乙肝肝衰竭（慢加急）的临床研究结果[6]。按照0.5x106/kg的细胞数，每4周治疗一次，外周静脉输入，治疗3次；和对照组相比，治疗组肝功能改善明显，12周内MELD评分降低，而且长期（80周）生存率提高到约70%（对照组为40%）。但是文章没有提及长期（48周及以上）的MELD评分的变化情况。

2015年成都军区总医院报道了异体脐带间充质干细胞治疗终末期肝病的临床研究结果[7]。经过2周的培养，3 x 107个细胞通过肝脏介入方法直接注射到肝脏。治疗24周时，经过间充质干细胞治疗的患者，肝功能改善明显，但是患者的凝血功能并没有得到改善，MELD评分从治疗前的平均8.49分下降到7.57分。此篇文章并没有提供患者24周后的随访数据，而且没有生存率方面的描述。

2017年中山大学第三附属医院第二次报道了在2010年到2013年期间开展的骨髓间充质干细胞（MSC）治疗乙肝慢加急肝衰竭患者的随机对照临床研究结果[8]。和2011年的第一次报道有所不同，这次是的骨髓间充质干细胞来源于异体，而且治疗方案变更为：每周一次，连续4周，外周静脉输入，细胞剂量为1.0-10×105 细胞/kg。24周时，对照组的生存率为55.6%，MSC治疗组的生存率为73.22%。

遗憾的是，在2013年至2016年期间，研究者并没有继续随访及总结数据，导致本次的临床研究没有超过24周的临床数据来明确长期治疗的效果。另外，文章也没有解释：为何不同的患者，给与不同的异体MSC剂量？MSC剂量变化由什么具体情况决定？

本次临床研究中，对照组和MSC治疗组的所有患者，在24周内，肝功能都改善明显，比如谷丙转氨酶和总胆红素下降，MELD评分下降；对照组出现多器官衰竭和严重感染的患者明显多于MSC治疗组。但是，从文章提供的表格（原文的table 3）来看，在24周时，MSC治疗组和对照组的肝功能指标并没有统计学差异。

而有意思的是，作者对数据进行技巧性处理，即对肝功能指标的变化做了统计学分析，得出MSC治疗组的总胆红素和MELD评分的变化优于对照组，即使两组的实际数值比较没有差异。

讨论和总结：

虽然有专家认为骨髓单个核细胞可以称为“骨髓干细胞”，但是这些文章作者却不敢妄称为“骨髓干细胞”，明确提出：这些骨髓细胞（bone marrow cell，BMC）为骨髓单个核细胞（MNC）[1-3]。这些骨髓单个核细胞没有经过培养扩增，直接分离后输入患者体内。骨髓单个核细胞是一个混合细胞群体，骨髓间充质干细胞的含量大概占单个核细胞（MNC）的0.001%-0.01%，含量非常稀少[9, 10]；而造血干细胞（HSC）大概占单个核细胞（MNC）的0.63%-1.05%[11, 12]。和骨髓所有的细胞相比，间充质干细胞和造血干细胞占的比例就更低了，分别为大约0.0005%和0.005%[12]。骨髓单个核细胞虽然能短期改善肝功能，但长期效果欠佳，而且很难评价骨髓单个核细胞改善肝功能是通过哪类干细胞起作用的。

从骨髓单个核细胞到经过培养纯化的间充质干细胞治疗，是一种细胞治疗技术的进步；从所有患者给与相同的间充质干细胞细胞数到根据体重来确定细胞数，也是一种治疗上的进步。其实，体重是一个很重要的决定细胞数的参数，病情轻重也是一个非常重要的参数。目前的临床报道文献中，尚未见研究者根据患者的病情来调整细胞数。

从目前的数据解读，可以初步得到一些有规律性的认识。比如，异体间充质干细胞治疗的效果优于自体间充质干细胞（详见2011年和2017年的报道数据）；即使同样是异体脐带间充质干细胞治疗，治疗方案不一样，导致的治疗效果也出现差异（详见2012年和2015年的报道数据）；同样是异体和多次反复输入治疗，脐带间充质干细胞治疗后12周的MELD评分明显低于对照组，但是骨髓间充质干细胞治疗后12周的MELD评分和对照组没有差异（详见2012年和2017年的报道数据）。

不同的研究单位，采用不同的治疗方案，导致治疗的结果不利于客观科学的相互比较。目前比较一致的结论，就是间充质干细胞能提高肝衰竭患者的生存率，而且临床治疗的安全性非常好。但是，必须清楚地认识到，MSC治疗组是在常规治疗的基础上联合MSC治疗，而不是单纯的MSC治疗。

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参考文献

1. Terai, S., T. Ishikawa, K. Omori, K. Aoyama, Y.Marumoto, Y. Urata, et al., Improved liver function in patients with livercirrhosis after autologous bone marrow cell infusion therapy. Stem Cells, 2006. 24(10):2292-8.

2.Lyra, A.C., M.B.Soares, L.F. da Silva, M.F. Fortes, A.G. Silva, A.C. Mota, et al., Feasibilityand safety of autologous bone marrow mononuclear cell transplantation inpatients with advanced chronic liver disease.World J Gastroenterol, 2007. 13(7):1067-73.

3.Saito, T., K. Okumoto,H. Haga, Y. Nishise, R. Ishii, C. Sato, et al., Potential therapeuticapplication of intravenous autologous bone marrow infusion in patients withalcoholic liver cirrhosis. Stem CellsDev, 2011. 20(9):1503-10.

4. Kharaziha, P., P.M.Hellstrom, B. Noorinayer, F. Farzaneh, K. Aghajani, F. Jafari, et al.,Improvement of liver function in liver cirrhosis patients after autologousmesenchymal stem cell injection: a phase I-II clinical trial. Eur J Gastroenterol Hepatol, 2009. 21(10):1199-205.

5.Peng, L., D.Y. Xie,B.L. Lin, J. Liu, H.P. Zhu, C. Xie, et al., Autologous bone marrow mesenchymalstem cell transplantation in liver failure patients caused by hepatitis B:short-term and long-term outcomes.Hepatology, 2011. 54(3):820-8.

6.Shi, M., Z. Zhang, R.Xu, H. Lin, J. Fu, Z. Zou, et al., Human mesenchymal stem cell transfusion issafe and improves liver function in acute-on-chronic liver failure patients. Stem Cells Transl Med, 2012. 1(10):725-31.

7.Xue, H.L., W.Z. Zeng,X.L. Wu, M.D. Jiang, S.M. Zheng, Y. Zhang, et al., Clinical therapeutic effectsof human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells transplantation in thetreatment of end-stage liver disease.Transplant Proc, 2015. 47(2):412-8.

8.Lin, B.L., J.F. Chen,W.H. Qiu, K.W. Wang, D.Y. Xie, X.Y. Chen, et al., Allogeneic BoneMarrow-Derived Mesenchymal Stromal Cells for HBV-Related Acute-on-Chronic LiverFailure: A Randomized Controlled Trial.Hepatology, 2017.

9.Pittenger, M.F., A.M.Mackay, S.C. Beck, R.K. Jaiswal, R. Douglas, J.D. Mosca, et al., Multilineagepotential of adult human mesenchymal stem cells. Science, 1999. 284(5411):143-7.

10.Kuznetsov, S.A., M.H.Mankani, P. Bianco,P.G. Robey, Enumeration of the colony-formingunits-fibroblast from mouse and human bone marrow in normal and pathologicalconditions. Stem Cell Res, 2009. 2(1):83-94.

11.Dedeepiya, V.D., Y.Y.Rao, G.A. Jayakrishnan, J.K. Parthiban, S. Baskar, S.R. Manjunath, et al.,Index of CD34+ Cells and Mononuclear Cells in the Bone Marrow of Spinal CordInjury Patients of Different Age Groups: A Comparative Analysis. Bone Marrow Res, 2012. 2012:787414.

12.Posel, C., K. Moller, W.Frohlich, I. Schulz, J. Boltze,D.C. Wagner, Density gradient centrifugationcompromises bone marrow mononuclear cell yield. PLoS One, 2012. 7(12):e50293.

来源：间充质干细胞（微信号 MSC-application）   作者：东海先生