NEJM重磅：脐带血衍生的IL-15“装甲”CAR-NK疗法治疗CD19阳性淋巴瘤达73%的缓解率

近几年里，免疫疗法——利用并加强患者免疫系统的力量来攻击肿瘤的疗法——已经成为癌症治疗的“第五支柱”。其中直接利用人体内的免疫细胞，将它们在体外进行改造，大量复制后再回输到患者体内，这种过继性免疫细胞疗法几乎占据了当今肿瘤免疫治疗策略开发的半壁江山。

目前，基于嵌合抗原受体(CAR)的细胞疗法在恶性血液肿瘤中展现出的强大实力，使其成为近年来最有前景的肿瘤免疫细胞疗法。迄今为止，全球范围内已有两种靶向CD19的CAR-T疗法成功上市，用于治疗某些B细胞恶性肿瘤。然而，CAR-T细胞可以诱导大量的毒性作用，并且细胞的制造是复杂的。

以前的研究表明，针对CD19的CAR-T细胞疗法在急性B细胞淋巴细胞白血病（ALL）患者中产生了68%到93%的缓解率，在慢性淋巴细胞白血病（CLL）中患者中缓解率57%到71%，在非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者中缓解率64%到86%。这些缓解在一定比例的案例中是持久的。

“一旦CD19阳性肿瘤患者复发多次，就没有明确的护理标准，这些病人的结果是令人沮丧的，”德克萨斯大学MD Anderson癌症中心干细胞移植系转化研究主任和内科研究员Katy Rezvani博士，“对于我们研究中的大多数患者来说，还没有一个明确的替代治疗标准。可以考虑对这些患者进行异基因造血干细胞移植，但由于缺乏供体或与这一过程相关的严重毒性，只有少数患者符合条件。”

而自然杀伤(NK)细胞经修饰后表达抗CD19 CAR，有可能克服这些限制。今日，来自MD安德森癌症中心一项多中心I/II期临床试验（NCT03056339)的研究结果发表在《新英格兰医学杂志》上，嵌合抗原受体（CAR）介导的NK细胞（自然杀伤细胞）在复发或难治性CD19阳性NHL和CLL患者中诱导了高应答率，且未出现重大毒副作用。

该NK细胞有一个逆转录病毒载体，能表达编码抗CD19 CAR、白介素-15（IL-15）和诱导caspase 9作为安全开关的基因。研究人员将细胞体外扩增，并在淋巴耗损化疗后以三种剂量之一(1×105、1×106或1×107CAR-NK细胞/kg)单次输注。中位随访时间为13.8个月(范围2.8-20)。

Rezvani及其同事对11名复发或难治性NHL或CLL患者(中位年龄60岁，男性，n=7)使用这种人类白细胞抗原(HLA)不匹配的来源于脐带血的抗CD19 CAR-NK细胞，这些患者此前已接受中位数为4(范围，3-11)的先前治疗。

结果显示11例患者中8例(73%)出现了客观反应，其中7例(4例为淋巴瘤，3例为CLL)完全缓解。1例患者Richter转化部分缓解，但仍然有持续的CLL。反应发生在输注后30天内的所有剂量水平。注入的CAR-NK细胞在低水平下扩增并持续至少1年。

接受CAR-NK细胞治疗的患者未出现治疗相关的细胞因子释放综合征、神经毒性或移植物抗宿主病。研究人员也没有观察到炎症细胞因子(包括IL-6)水平从基线水平上升。

博得武田青睐的领先CAR-NK平台

为了加快过继性细胞疗法（ACT）的进程，在B细胞淋巴瘤的治疗中，MD Anderson癌症中心从早期的CD19 CAR-T细胞治疗模式转向了对癌细胞具有更强杀伤力、并且治疗后不会产生异常反应的CAR-NK细胞疗法，并因此获得了成熟的ACT平台。

2017年6月，他们利用脐带血诱导分化出了NK细胞，并进行嵌合抗原受体改造，用逆转录病毒载体修饰CAR NK细胞，插入了识别CD19的CAR，并以传递基因增强其攻击特定肿瘤细胞的效力（其中CD19 CAR增加了细胞对B细胞恶性肿瘤识别的特异性，而免疫细胞因子IL-15增强了CAR-NK细胞在体内的增殖和存活）。

这项细胞疗法被用于治疗复发或者耐药性CLL、ALL以及NHL，并且试验已经进入临床Ⅰ、Ⅱ期阶段。该癌症中心计划未来将使CD19 CAR-NK细胞疗法应用于门诊。

2019年11月5日，武田（Takeda）制药有限公司和MD安德森癌症中心（MD Anderson）宣布了一项独家许可协议和研究协议，以开发脐带血衍生的、用IL-15“武装”的CAR NK细胞疗法，用于治疗B细胞恶性肿瘤和其他癌症。

CAR-NK，不仅仅是血液肿瘤

自然杀伤细胞（natural killer cell, NK细胞）是人体先天免疫系统的一部分，能对身体内遇到的各种病原体迅速作出反应，是抵御危险感染或异常细胞的第一道防线，是身体对抗癌症的正常储备。

它与获得性免疫系统中的细胞毒性T细胞，扮演着相近的角色。但它们之间不同的是：通常情况下，细胞毒性T细胞需要检测到病毒细胞表面的MHC，才会引起细胞因子的释放，进而导致靶细胞裂解或凋亡；而NK细胞可以在没有抗体或MHC的情况下，识别这些细胞并进行快速的免疫响应。对于那些失去自身标记的MHC-I型的细胞，NK细胞不经过激活就可以进行杀伤。而这些细胞通常是有害但不能被其他免疫细胞发现并消灭的。

NK细胞因不同于T细胞的非特异性识靶及杀伤机制吸引科学家将工程CAR-T技术沿袭并用于CAR-NK改造。无论在体外细胞模型还是小鼠动物模型中，CAR-NK均显示出良好的肿瘤杀伤效果。同时基于NK细胞的多种抗癌策略也得到进一步开发。目前越来越多的企业投入NK细胞领域，一些企业的CAR-NK细胞在治疗血液和实体瘤方面都取得了不错的临床进展。

NantKwest

2019年6月25日，NantKwest公司的PD-L1 t-haNK新药临床试验申请（IND）获得美国FDA批准，这是该项目在局部晚期或转移性实体瘤中的首次人体临床试验。2019年12月2日，该公司宣布在QUILT-3.064试验的前六名患者中获得了令人鼓舞的安全性数据。这项首次人体试验(first-in-human)评估了该公司全球首创(First-in-class) PD-L1 t-haNK细胞疗法的安全性和初步疗效。

在2020年1月举行的第38届JP Morgan医疗健康大会上，黄馨祥博士带着“登月计划”的患者的临床数据，展示了PD-L1.t-haNK联合N-803疗法在一例转移性胰腺癌中完全缓解。受此影响，NantKwest的股价收盘上涨91％，至6.80美元，是自2015年股票开始交易以来的最大涨幅

基于NantKwest公司的t-haNK平台的PD-L1 t-haNK细胞疗法旨在通过使用CAR结构体提供精确的肿瘤细胞特异性，该结构体利用PD-L1特异性scFv（单链抗体片段）设计到该公司专有的haNK细胞中以调节抗体依赖性细胞毒性（ADCC）。PD-L1 t-haNK细胞来自人类衍生的同种异体NK细胞系，经过工程设计以表达靶向PD-L1的CAR，其起源于NantKwest专有的NK-92(aNK)主细胞库。除了靶向PD-L1，PD-L1.t-haNK还被工程化表达CD16受体(V158 FcγRIIIa)的高亲和力变体，是首次设计的，GMP级的，冷冻保存的，现成的双突变NK细胞疗法。

Fate Therapeutics

2019年9月，美国FDA批准Fate Therapeutics公司首个具有三种抗肿瘤模式的现成CAR-NK细胞疗法(FT596)的IND申请。FT596在不到一年的时间里被FDA批准进行临床研究，Fate公司还计划启动FT596单药及联合CD20单抗治疗B细胞淋巴瘤和慢性淋巴细胞白血病的临床研究。

FT596源自iPSC细胞系，其独特的设计旨在克服CD19抗原逃逸，除了有靶向CD19的专有CAR以外，它还表达了一种新型的高亲和力、不可裂解的CD16(hnCD16) Fc受体，该受体已被修饰以增强抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)，从而能够同时靶向CD19和其他肿瘤相关抗原，例如CD20。FT596还表达白介素15受体融合蛋白(IL-15RF)，这是一种有效的细胞因子复合物，无需系统性细胞因子支持，即可促进NK细胞和CD8 T细胞的存活、增殖和反式激活。

Nkarta Therapeutics

Nkarta公司专有的NK细胞治疗平台旨在通过增强靶向性、大量的扩增和延长这些免疫细胞的持久性，最大限度地提高NK细胞的治疗效果，从而释放出强大而持久的抗癌免疫介导攻击。

2019年9月5日，该公司完成了由Samsara BioCapital领投的1.14亿美元B轮融资。这笔资金的目的是支持Nkarta的两个临床试验项目，即靶向NKG2D的同种异体NK细胞治疗（NKX101），用于血液恶性肿瘤或实体肿瘤患者；以及其针对B细胞恶性肿瘤CD19的CAR-NK项目的IND授权和临床试验。

NKX101，被该公司称为第四代CAR-NK细胞。与T细胞中编程的嵌合抗原受体(通常对应于一个抗原)不同，它们的CAR被设计用来命中一个名为NKG2D的目标，该目标在肿瘤细胞上最多可找到的8种相关配体。Nkarta还在基于其广泛的NK细胞工程平台开发其他候选产品。该公司预计在2020年在南旧金山完成GMP生产设施，为其早期临床试验提供研究产品。

科济生物

2017年底，科济生物联合上海市肿瘤研究所、上海交通大学附属仁济医院在权威医学期刊Molecular Therapy发表了第一篇靶向GPC3的CAR-NK治疗肝细胞癌的研究论文。结果显示，由科济生物联合上海市肿瘤研究所利用自主知识产权抗体制备的GPC3-CAR-NK细胞株（NK-92/9.28.z）在体内外均能够特异性地靶向并杀伤表达GPC3的肝细胞肝癌，并且不受血清水平可溶性GPC3、实体瘤低氧环境和TGF-β的影响。

由NK-92细胞系衍化的CAR-NK细胞，具有可批量生产并且通用型的特点受到了业界广泛关注。与目前的CAR-T细胞治疗相比，CAR-GPC3-NK治疗方案节约大量成本。

结语

NK细胞作为先天免疫中重要的效应细胞，具有强大的抗肿瘤功能。随着免疫治疗领域的不断发展，诸多基于NK细胞生物特点的创新和发展取得了一系列的显着成果，NK细胞与CAR等创新技术结合的巨大潜力为肿瘤免疫治疗领域注入了更多信心。

参考出处：

1.https://www.healio.com/hematology-oncology/lymphoma/news/online/%7B8270eead-8d68-4e94-a025-4a65b87c1982%7D/car-natural-killer-cell-therapy-induces-response-in-non-hodgkin-lymphoma-cll

2.https://medicalxpress.com/news/2020-02-cd19-car-nk-cell-therapy-response.html

3.DOI:10.1056 / NEJMoa1910607

4.文中各公司官网

来源： 医麦客   作者：江江